DNA sequencing and Genomes Exam Questions and Answers Latest Update Graded A+
2 vues 0 fois vendu
Cours
DNA sequencing and Genomes
Établissement
DNA Sequencing And Genomes
DNA sequencing and Genomes Exam Questions and Answers Latest Update Graded A+
Sanger sequencing development - Answers Developed in 1977 Fred Sanger
•Called Sanger Sequencing - still used today
Sanger sequencing - Answers DNA sequencing method based on selective incorporation of chain-terminati...
DNA sequencing and Genomes Exam Questions and Answers Latest Update Graded A+
Sanger sequencing development - Answers Developed in 1977 Fred Sanger
•Called Sanger Sequencing - still used today
Sanger sequencing - Answers DNA sequencing method based on selective incorporation of chain-
terminating inhibitors (dideoxynucleotides) by DNA polymerase during in vitro DNA replication
Dideoxynucleotides ddNTPs, and the Sanger sequencing reaction - Answers ddNTPs are chain
terminating nucleotide bases - their 3'-hydroxyl (OH) group is replaced by a hydrogen molecule, so once
added, the DNA polymerase is unable to add another nucleotide onto the strand of DNA. So once
dideoxynucleotide is added it blocks further polymerisation by DNA polymerase
•For Sanger sequencing, the ingredients are the same as for PCR, except the ratio of dNTP:ddNTP =
100:1 & a single primer is used. Only 1 cycle used.
•The template can be a PCR product or plasmid.
Sanger sequencing - 1977-1980s - Answers The reaction leaves strands of DNA of different lengths. To
see the identity of the ddNTP at the end of the strand:
•Size separation by gel electrophoresis
•Used 4 separate sequencing reactions, each with a different radioactive ddNTPs (ddATP, ddGTP, ddCTP,
ddTTP).
•Electrophoresis using polyacralamide to separate by size
•Use photographic paper to for detection of radioactive DNA strands
•Manual process
Sanger sequencing-1990's to- present - Answers Sequencing reaction using a mixture fluorescently
labelled ddNTPs, and normal dNTPs. Each base has a different fluorescent "colour"
, Chain-termination PCR produces mixture of
DNA strands of different lengths
Size separation by gel electrophoresis, each DNA strand ends in a 'ddNTP terminator'
Detection of fluorescent products using a laser (automated) - same method for microsatellite
genotyping
Genome - Answers The complete set of genetic information present in a cell or organism
Genome size - Answers (the total number of the DNA base pairs in one copy of a haploid genome) varies
widely across species
Nuclear genome of the human genome - Answers DNA encoded within the 23 chromosome pairs found
in nuclei
Mitochondrial genome - Answers a small circular DNA molecule found within individual mitochondria
encoding 37 genes (2 rRNAs, 22 tRNAs and 13 polypeptides)
•1989 - UK Medical Research Council (MRC) & USA jointly funded the Human Genome Project
•1990 - project begins: International team of researchers start - worlds largest collaborative biological
project
•2003 - Completed
Human genome project - goals - Answers •Identify and map all genes in the human DNA from a physical
and functional standpoint
•Determine the sequences
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur TutorJosh. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €7,79. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.
