Resume
samenvatting theorie en praktijk examen
- Établissement
- Universiteit Antwerpen (UA)
goede samenvatting voor zowel theorie als praktijk
[Montrer plus]
Vendeur
S'abonner
Aperçu du contenu
20232024
Celcultuur en immunochemie
PROF PAUL COS, INTRODUCTIE IN HET KWEKEN VAN DIERLIJKE CELLEN
FEMKE VAN NIMMEN
,0. EXAMENVERLOOP
- Schriftelijk zonder mondelinge toelichting
- 12 punten op “celculturen en ELISA”
- 8 punten op “flow cytometrie”
- Enkel open vragen
1
,1. INLEIDING
1.1 GESCHIEDENIS
Doorbraak in celculturen zo’n 100 jaar geleden (1950) door 3 belangrijke ontdekkingen:
1) Antibiotica: besmetting voorkomen bij celkweek voor 1950: bacteriën overgroeide weefsel omdat
ze sneller groeien
2) Trypsine: cellen losmaken van cultuurflessen
3) Chemisch gedefinieerde cultuurmedia (vaste hoeveelheden glucose, eiwitten, …) voor 1950: werd
bloed gebruikt = geen ideaal medium (elk bloed is verschillend)
Celcultuur = essentieel in biomedisch onderzoek:
Opbouw virus: RNA of DNA omgeven door nucleocapside (= eiwitmantel) virussen hebben spikes om zich
aan de receptoren van cellen te hechten virus dringt vervolgens in cel om zich te vermenigvuldigen
2 soorten virussen:
- Naakt virus: spikes (= glycoproteïnen) zitten op de eiwit mantel bv: polio
- Enveloppe virus: envelop (= celmembraan) zit rond de nucleocapside op de eveloppe zitten de
spikes
Virus = obligaat intracellulair virus heeft cellen nodig om zich te vermenigvuldigen
Poliovirus wordt gekweekt in menselijke embryonale cellen 2 soorten vaccin tegen polio
- Formaline geïnactiveerd poliovaccin: formaline zorgt ervoor
dat de structuur van het levend infectieus virusdeeltje
behouden wordt, zodat het lichaam juist reageert + formaline
inactiveerd het virus zodat het geen ziekte kan verwekken
maar wel het immuunsysteem activeerd
- Levend verzwakt poliovaccin: virusdeeltje in labo kweken
(soms betere immuunrespons)
1) Cultuurfles: cultuurmedium + cellen die zich onderaan in de fles vasthechten cellen
vermenigvuldigen zich en vormen een monolaag
2) Virusdeeltje toedienen aan cellen virus vermenigvuldigt zich en infecteert alle cellen
3) Virusdeeltje wordt overgebracht naar een nieuwe cultuurfles vermenigvuldigt zich opnieuw
Bij de vermenigvuldiging ontstaan soms verzwakte mutanten deze worden in het vaccin gebruikt
2
, HELA cellen: cellen van een vrouw die leed aan baarmoederhalskanker cellen worden gebruikt voor
onderzoek naar de moleculaire basis van kanker en nieuwe kankertherapieën
Hybridoma-technologie = technologie die het toelaat om cellen continu monoklonale antilichamen te laten
produceren
Hybridoma = cel die ontstaat door de fusie van een B-lymfocyt met een kankercel (myeloma) cel heeft
oneindige levensduur (van myeloma) en produceert antilichamen (B-lymfocyt)
Cel- en weefseltechnologie : doel = verkrijgen van (bio)implantaten om uitgevallen of slechtwerkende organen
en weefsels te ondersteunen of vervangen bv: skingrafting
Diabetes: weefsels implanteren waarvan de cellen genetisch zijn aangepast zodat ze kunnen dienen voor de
geregelde afgifte van insuline
1.2 VOORDELEN VAN CEL- EN WEEFSELKWEEKCULTUREN
- Controle van de omgeving
Fysicochemische parameters: pH 7.4, temperatuur 37°C, Osmotische druk 0.9% NaCl, O 2 21% en CO2
0.03%
fysiologische parameters: voedingsstoffen: % serum, medium
Maar: meeste cellijnen hebben nood aan media, gesupplementeerd met serum. Dit is nadelig want
serum is gevoelig aan lotvariatie en bevat ongedefinieerde elementen (hormonen)
- karakterisatie en homogeniteit
meeste weefselculturen = homogeen, behalve orgaancultuur. Door subcultivatie neemt
homogeniteit toe: cellen worden gemengd en geselecteerd naar 1 celtype.
Na verloop van tijd kunnen er mutaties ontstaan belangrijk om cryostok aan te maken
deel van de cellen uit een cultuurfles worden gesubcultiveerd + deel wordt ingevrozen met
vloeibaar stikstof (N2) = cryostok
- Kostprijs
= goedkoper dan proefdierexperimenten
1) Miniaturisatie (microliter-niveau) + afwezigheid van excretiemechanismen hierdoor
slechts kleine hoeveelheden reagentie en monster nodig
2) Aankoop en onderhoud = goedkoper dan bij proefdiren
Geen ethische vragen (wel bij proefdieren)
- In-vitromodellering van in-vivo-omstandigheden
3
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur femkevannimmen. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €10,66. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.
Peut-on faire confiance à Stuvia ?
4.6 étoiles sur Google & Trustpilot (+1000 avis)
80467 résumés ont été vendus ces 30 derniers jours
Fondée en 2010, la référence pour acheter des résumés depuis déjà 14 ans