Resume
samenvatting- WPO
- Établissement
- Vrije Universiteit Brussel (VUB)
Deze samenvatting omvat alles over de slides en handleiding van de WPO van celbiologie
[Montrer plus]
Vendeur
S'abonner
Aperçu du contenu
WPO 2I. inleiding
histologie bestudeert samenstelling weefsels: nadruk v celtypen in weefsel = m.b.v. microscoop bekeken
celtypen = verschillen door vorm + zichtbare eigenschappen + functies
wnr cellen groeperen = weefsel
weefsel = geordende groep cellen met gelijkaardige eigenschappen verkregen door celdifferentiatie
II. correct gebruik van lichtmicroscoop
beste = om “Köhler-belichting” toe te passen
1. lichtschakelaar aanzetten (lichtsterkte)
2. preparaat in houder plaatsen (onder object)
3. lokaliseren weefsel (kleinste vergroting)
4. scherpstellen
5. velddiafragma bijna dichtdraaien
6. condensor + focus scherpstellen (beeld oculair scherp)
7. diafragmalichtvlek centreren
8. velddiafragma opendraaien tot hele veld juist belicht
9. apertuurdiafragma regelen (contrast)
10. overgaan naar hogere vergroting: herhaal stap 4-9
immersie-objectief (100x) enkel gebruiken na druppeltje immersie-olie op preparaat
II.1 het maken van tekeningen
• celgrenzen
• grootteverhoudingen ltl v celtypen
• verhouding kern/cytoplasma
• teken groepje cellen in weefselverband
• getekende vergroting
• 1cel = 2cm
III. vervaardigen van preparaten
III.1 het vervaardigen van weefselcoupes
wrm preparaten ? biologisch materiaal = weinig lichtdoorlatend + geeft weinig contrast
doel ? cellen + weefsel observeerbaar maken voor LM/EM
methode ?
1) fixeren van weefsel: zodat geen morfologische wijzigingen
doel? weefsel vastleggen in vivo toestand (=oorspronkelijke structuur) zonder artefacten optreden +
beschermen weefsel tegen autolyse, anoxie en microbiële aantasting (=3 oorzaken artefacten)
! wnr weefsel bewerkt kunnen artificiële structuren optreden ≠ overeenkomen reële situatie levende cellen!
• via chemische stoffen (=fixatieven): tijdens fixatie treedt denaturatie of ‘cross-linking’ op van
eiwitten in weefsel => werking eiwitten stilgelegd + werking enzymen (=verantwoordelijk uiteenvallen
cellen en weefsels bij isolatie uit lichaam/ na dood =>3 chemicaliën: formaldehyde + glutaaraldehyde +
osmiumtetroxyde MAAR voor paraffinepreparaten = Bouin’s fixatief: mengsel picrinezuur + formaldehyde
—>immersiefixatie: fixatie van buiten uit waarbij weefsel na isolatie uit lichaam in fixatief
ondergedompeld
—>perfusiefixatie: fixatie van binnen uit = enkel mogelijk bij proefdieren => lichaam dier
geperfuseerd + bloed EERST vervangen door NaCl DAN door fixatief (=paraformaldehyde)
• via fysische methode: weefsel gefixeerd door vriezen vloeibare stikstof: snelle diagnose pathologie nodig
, 2) inbedden: weefsel ingebed in materie hard genoeg om coupes maken => paraffine OF plastics
methacrylaat EN epon(= vooral bij EM) => HOE harder inbedmedium, HOE dunner coupes
EERST water uit weefsel verwijderen => coupes onderdompelen baden met stijgende alcoholconcentratie
= dehydratatie
DAN alcohol vervangen door oplosmiddel waarin inbedmiddel oplosbaar is => penetratie inbedmiddel
volgende fase vereenvoudigen
LAATSTE weefsel in vloeibaar inbedmiddel gelegd (vb; warme paraffine) waarna laat hard worden
! inbedmiddel MOET weefsel volledig binnendringen om goede coupes te maken ANDERS slecht zichtbaar !
3) snijden: preparaat voldoende dun om licht door te laten => coupes snijden van weefsel OF orgaan
coupes LM = 3-12 um MAAR coupes TEM = 50-100 nm
v soorten coupes: vries-, paraffine- of epon-coupes
=> dwars of overlangs snijden
• vriespreparaten: + snel proces - morfologie gaat snel kapot
1)weefsel snel vriezen in vloeibare stikstof
2)coupes gesneden m.b.v. vriesmicrotoom
3)coupes gedroogd
4)opnieuw gefixeerd (immersie organische solventer)
5)coupes kleuren (kleurstoffen/ antilichamen)
• paraffine-/ eponcoupes: + behouden langer - trager proces
als coupes ≠ rehydrateert: kleuring ≠ diep genoeg
III.2 het verwerken van celsuspensies
suspensies van losse cellen = op microscoopglaasjes gebracht d.m.v. v technieken
• uitstrijkje = gemaakt door druppeltje suspensie met voorwerpglas over 2de glaasje uitstrijken zodat
dunne film vormt + film aan lucht gedroogd + gefixeerd
• cytospinpreparaat = gemaakt door in speciaal uitgeruste tafelcentrifuge cellen te sedimenteren op
voorwerpglaasje
• celpellet = centrifugeren van celsuspensie tot vast propje cellen
IV. toepassingen van de (licht)microscoop
IV.1 histologie
= weefsels bestudeerd: zowel normale weefsels als pathologische weefsels
weefsels = kleurloos =>v kleuringen toegepast om weefsels + cellen te contrasteren
1) geïsoleerde leverparenchymcellen, rat, toluidineblauw (epon)
behandeling met enzymen (collagenase) => lever herleid tot suspensie losse cellen
bloedvat = omringd door membranen MAAR sinusoïd niet, WEL gemaakt door omringende hepatocyten
bij grote vergroting onderscheiden we ronde kern met 1/2 nucleoli + cytoplasma met donkergekleurde
“eilandjes” van organellen
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur cameroncroese. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €16,06. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.
Peut-on faire confiance à Stuvia ?
4.6 étoiles sur Google & Trustpilot (+1000 avis)
79202 résumés ont été vendus ces 30 derniers jours
Fondée en 2010, la référence pour acheter des résumés depuis déjà 14 ans