Resume
Samenvatting - Biotechnologie I
- Cours
- Biotechnologie I
- Établissement
- Odisee Hogeschool (Odisee)
Een gedetailleerde samenvatting van het vak biotechnologie I. Dit van hoofdstuk 11 tot hoofdstuk 29.
[Montrer plus]
Vendeur
S'abonner
Aperçu du contenu
Biotechnologie IInhoud
Deel III: Transcriptie................................................................................................................................3
Hoofdstuk 11: Samenstelling, structuur en voorkomen van RNA.......................................................3
11.1 Samenstelling..........................................................................................................................3
11.2 Algemene structuur................................................................................................................3
11.3 Voorkomen.............................................................................................................................3
11.4 Belangrijke RNA-manipulerende enzymen.............................................................................3
Hoofdstuk 12: Transcriptie bij prokaryoten versus bij eukaryoten......................................................3
12.1 Transcriptie bij prokaryoten....................................................................................................3
12.2 Transcriptie van de eukaryoten...............................................................................................6
Hoofdstuk 13: Transfer RNA (tRNA)....................................................................................................8
13.2 De structuur............................................................................................................................8
13.3 Koppeling van het aminozuur...............................................................................................10
13.4 Pre-tRNA...............................................................................................................................11
Hoofdstuk 14: Ribosomaal RNA (rRNA)............................................................................................11
14.2 Ribosomen............................................................................................................................11
14.3 Prokaryotische ribosomen....................................................................................................11
14.4 Eukaryotische ribosomen......................................................................................................12
Hoofdstuk 15: Boodschapper RNA (mRNA).....................................................................................13
Hoofdstuk 16: Splicing van prematuur RNA......................................................................................14
16.2 Mechanisme van RNA-splicing..............................................................................................15
Hoofdstuk 17: Andere soorten RNA..................................................................................................16
17.1 Small nuclear RNA en Long non-coding RNA........................................................................16
17.2 Micro RNA (miRNA)..............................................................................................................16
Deel IV: Technieken...............................................................................................................................19
Hoofdstuk 18: Omgaan met RNA......................................................................................................19
Hoofdstuk 19: Concentratiebepaling RNA........................................................................................20
Hoofdstuk 20: Isolatie van RNA.........................................................................................................21
Hoofdstuk 21: kwaliteitscontrole RNA..............................................................................................22
Hoofdstuk 22: Boodschapper RNA omzetten naar complementair DNA..........................................23
Hoofstuk 23: Isolatie specifieke soorten RNA...................................................................................25
Hoofdstuk 23: In vitro transcriptie/translatie...................................................................................26
Deel V: DNA replicatie...........................................................................................................................27
1
, Hoofdstuk 25: Replicatie van DNA....................................................................................................27
25.1 DNA-replicatie gebeurt semiconservatief.............................................................................28
25.2 DNA-replicatie gebeurt meestal bidirectioneel.....................................................................28
25.3 DNA-replicatie door middel van DNA-polymerasen..............................................................30
25.4 Een groeivork heeft een continue leading en een discontinue lagging streng......................30
25.5 Overzicht van de voornaamste enzymen betrokken bij de DNA-replicatie...........................31
25.6 De oorsprong van replicatie..................................................................................................32
25.7 Rolling circles als alternatieve replicatiewijze.......................................................................32
25.8 DNA-polymerase van een eukaryoot....................................................................................33
Deel VI: Replicatietechnieken...............................................................................................................33
Hoofstuk 26: Polymerase chain reaction (PCR).................................................................................33
26.2 Reactievoorwaarden.............................................................................................................34
26.3 Toepassingen........................................................................................................................39
Hoofdstuk 27: Afgeleide PCR technieken..........................................................................................40
27.1 Specificiteit van PCR opdrijven door de PCR lichtelijk te wijzigen.........................................40
27.2 RT-PCR...................................................................................................................................40
27.3 Multiplex PCR........................................................................................................................43
27.4 Long range PCR.....................................................................................................................44
27.5 RFLP-PCR en AS-PCR..............................................................................................................44
27.6 AFLP-PCR...............................................................................................................................48
27.7 RAPD.....................................................................................................................................49
27.8 Methylspecifieke PCR............................................................................................................50
27.9 Mutaties aanbrengen via primers.........................................................................................51
Hoofdstuk 28: Kwantitatieve PCR (qPCR)..........................................................................................54
28.1 Berekeningen voor relatieve/absolute kwantificatie.............................................................56
28.2 DNA detectormolecule.........................................................................................................59
Hoofdstuk 29: Droplet digital PCR (ddPCR).......................................................................................65
2
,Deel III: Transcriptie
Hoofdstuk 11: Samenstelling, structuur en voorkomen van RNA
11.1 Samenstelling
RNA is opgebouwd uit:
Ribonucleotiden opgebouwd uit:
- Heterocyclische base: adenine, guanine, cytrosine of uracil
- Ribose
D-ribose
- Fosfaatgroep
11.2 Algemene structuur
RNA= bijna altijd lineair en enkelstrengig
Een secundaire structuur door hun korte dubbelhelicale gebieden
Tertaire structuur sommige RNA’s (bv.rRNA)
Stabiliteit is te danken aan:
- G-C gehalte
- Ionensterkte
- Lengte van de secundaire structuur gebieden
11.3 Voorkomen
Bij prokaryoten, 3 soorten RNA’s:
- mRNA, messenger RNA het minste aanwezig
- rRNA, ribosomaal RNA het meeste aanwezig
- tRNA, transfer RNA
Bij eukaryoten, 4 soorten RNA’s:
- mRNA
- rRNA
- tRNA
- hnRNA, heterogeen nucleair RNA
RNA kan de functie van een genoom vervullen zowel ss als ds
11.4 Belangrijke RNA-manipulerende enzymen
RNA polymerase
Vormt de RNA ketting
RNase
Kan specifiek RNA afbreken
Reverse transcriptase
Schrijft een RNA matrijs over naar het complementair DNA
Hoofdstuk 12: Transcriptie bij prokaryoten versus bij eukaryoten
12.1 Transcriptie bij prokaryoten
12.1.1 Mechanisme
Synthese van RNA
3
, 1 type RNA-polymerasen
- RNA-polymerase gebruikt 1 van de DNA strengen als template en vertaald dit
Niet noodzakelijk altijd dezelfde streng binnen een genoom
- Geen primer nodig
- Synthese gebeurt van 5’ naar 3’
3 fasen in de transcriptie:
1) Initiatie (geïnhibeerd door rifampicine)
2) Elongatie (geïnhibeerd door streptolygidin)
3) Terminatie
12.1.2 Het bacterieel RNA-polymerase
RNA-polymerase is een enzymcomplex
- Holo-enzym bevat 5 verschillende polypeptide ketens
β’ DNA binding
β bindingsplaats voor rifampicine en streptolygidin
ℴ interactie is zeer zwak
α komt 2 maal voor, de rest maar 1 maal
ω behouden van de structurele conformatie van β’ en rekrutering
RNA-polymerase zonder ℴ subeenheid= core-enzym
12.1.3 Initiatie van transcriptie: promotors
De ℴ speelt enkel een belangrijke rol in de herkenning van de start van het DNA en dus het opstarten
van de transcriptie
Startplaatsen= promotors (sequentie, geen base)
Transcriptie start met holo-enzym, daarna enkel core-enzym nodig
Promotor:
+1= de startplaats
-10= pribnow box (2e gebied) RNA-polymerase bind top het DNA
-35= (3e gebied)
Sterke promotor bevat ook nog een -43 gebied= AT-rijk gebied
Mechanisme van de initiatie
Beginselen van de transcriptie
4
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur nettedevisscher. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €10,89. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.
Peut-on faire confiance à Stuvia ?
4.6 étoiles sur Google & Trustpilot (+1000 avis)
79202 résumés ont été vendus ces 30 derniers jours
Fondée en 2010, la référence pour acheter des résumés depuis déjà 14 ans