Resume
Samenvatting - Practicum: biotechnologie en biochemie, Endocellulase (J000496A)
- Établissement
- Universiteit Gent (UGent)
Volledige samenvatting van Practicum Endocellulase Leerpaden + powerpoints
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Practicum endocellulaseEnzymen = belangrijkste eiwitten in het lichaam
Katalyseren scheikundige reacties, nodig om het leven in stand te houden
Alle reacties in het lichaam vinden plaats want het wordt door een specifiek eiwit mogelijk
gemaakt
Endocellulase = Hydrolase
Splitst β 1-4-bindingen in cellulose en cellulose derivaten
o Hier: hydroxyethylcellulose als substraat
Wateroplosbaar hydroxyethylether van cellulose
Farmaceutisch belang vd
proef
Activiteitsbepaling van enzymen in bloed of weefsels voor ziektediagnose (bv. bepaling
amilase in de urine voor pancreatitis)
o Dmv viscosimetrie
Viscositeit: weerstand tegen het vloeien
Hydroxyethylcellulose oplossen in water hoge viscositeit
o Endocellulase toevoegen
o Cellulose in kleine stukken splitsen
Substraat gesplitst door enzym, viscositeit daalt
Hoe snel daalt viscositeit over bepaalde tijd activiteit enzym
bepalen
Viscositeit meten: Ostwald viscometer
o Uitlooptijd meten = tijd dat vloeistof erover doet om van
punt A naar punt B te vloeien
o Eerst zonder toevoeging van het enzym, daarna met
o Relatieve viscositeit i.f.v. de gemiddelde reactietijd grafiek: activiteit enzym
bepalen
Parameters voor de viscositeit
o Uitlooptijd water t0: berekend uit uitlooptijd vd referentie-oplossing t S (tijd v. A nr B)
Aantal keer meten: vloeistof opnieuw opzuigen in viscometer en laten lopen
o Viscositeit water + viscositeit hydroxyethylcellulose-oplossing: gegeven tijdens proef
o T = totale reactietijd: start als enzym aan oplossing wordt toegevoegd
Aflezen als vloeistof aan het bovenste streepje is (A op figuur)
Hoe langer enzym inwerkt, hoe lager viscositeit oplossing (belangrijk om te
weten: hoelang is enzym al aan het inwerken voor je meet)
o Ln (relatieve viscositeit) uitzetten i.f.v. gemiddelde
reactietijd
Hydrolyse gaat door tijdens viscositeitsmeting
T + t0
o Enzymatische activiteit bepalen: vergelijking rechte +
richtingscoëfficiënt
Hydrolyse van H.E.C.: viscositeit vd H.E.C. oplossing zal afnemen
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