Naam: Laura Dries en Zoë Vanhout
Klas: 2FBTA
Opleidingsonderdeel: Lab Microbiologie II
Lector: Hannah Ceuleers
Verslag microbiële flora van de mond, keel en huid
1. Bepaling van de gevoeligheid voor tandbederf
DOEL
Identificatie van micro-organismen die tandbederf veroorzaken om op die manier de Met opmerkingen [CH1]: Je zal de groei van bepaalde
(welke?) micro-organismen nagaan in Snyder agar.
gevoeligheid van de patiënt de onderzoeken. Productie van ....?
PRINCIPE
L. acidophilus fermenteren carbohydraten die adheren op het tandoppervlak tot melkzuur Met opmerkingen [CH2]: Enkel deze?
(=lactic acids). Hierdoor zal de pH dalen met tot gevolg dat er in het tandglazuur
botontkalking en verzachting optreedt (= tandbederf).
Reactie:
De Snyder test meet de hoeveelheid zuur die geproduceerd wordt door Lactobacilli. Met opmerkingen [CH3]: Is dat zo? Weet je welke
hoeveelheid zuur er geproduceerd is na uitvoeren van deze
De test is selectief voor Lactobacillus. Het medium dat gebruikt wordt is Snyder agar met pH test?
van 4,7. Deze agar bevat glucose en de pH indicator bromcresol (= groen medium). Wanneer
m.o. glucose fermenteren zal de pH licht dalen naar 4,4. Bij deze pH wordt tandbederf
veroorzaakt. Er zal dan ook een kleurverandering van de agar optreden van groen naar geel.
Interpretatie resultaten: Met opmerkingen [CH4]: Bijschrift bij tabel?
Een tabel/figuur moet steeds op zichzelf kunnen staan
24u 48u 72u Tandbederf? zonder dat de lezer de hele tekst hiervoor moet lezen.
MATERIAAL Met opmerkingen [CH5]: Kijk nog eens in de rubriek voor
het verslag:
• Snyder agar tube Werkwijze en materiaal: zo geschreven dat
een opgeleide laboratoriumtechnoloog het
• Steriele pipet protocol kan uitvoeren. Enkel de parameters
• Steriel test buisje die variëren van experiment tot experiment
opsommen. Specifiek labmateriaal, merk en
type toestellen, firma, lotnummer en catalogus
nummer vermelden.
WERKWIJZE Met opmerkingen [CH6]: De Snyder agar zat toch in een
glazen fles?
Inzetten: Met opmerkingen [CH7]: Wetenschappelijker = proefbuis
, 1. Gelabelde Snyder agar buisje smelten en laten afkoelen tot 45°C. Met opmerkingen [CH8]: Heb je dat zo gedaan?
2. Speeksel opvangen in een steriel test buisje.
3. Het speeksel schudden en hiervan 0,2 mL met een steriele pipet bij de agar brengen.
De pipet mag de rand van de tube/agar niet raken.
4. Mengen door het buisje tussen de handpalmen te rollen
5. Er worden 2 blanco’s per klas aangemaakt. Met opmerkingen [CH9]: Waarom 2?
6. Incuberen voor 72 uur op 37°C. Lees de resultaten af na 24, 48 en 72 uur.
Aflezen:
1. Bekijk de Snyder test en ga na of er een kleurverandering is opgetreden. Gebruik een Met opmerkingen [CH10]: Na 24, 48 en 72u
blanco/controle tube om te vergelijken en contaminatie te controleren.
RESULTATEN Met opmerkingen [CH11]: De resultaten uit je tabellen
bespreek je ook kort in tekstvorm. Een tabel alleen volstaat
Blanco 1 Blanco 2 Staal niet.
Bijschrift bij tabel?
24u Groen (-) Groen (-) Groen (-) Tabelnummer?
48u Groen (-) Groen (-) Groen (-)
72u Groen (-) Groen (-) Groen (-)
Tandbederf? Geen contaminatie Geen contaminatie Geen
Resultatenvergelijking klasgroepen:
Groep Groep Groep Groep Groep Groep Groep Groep
1 2 3 4 5 6 7 8
24u + + + + + - - -
48u + + + + + - - -
72u + + + + + - - -
Tandbe opvalle opvalle opvalle opvalle Opvalle
Geen Geen Geen
derf? nd nd nd nd nd
INTERPRETATIE Met opmerkingen [CH12]: = Discussie
Het onderzochte staal vertoond geen verkleuring bij 24, 48 of 72 uur. Hieruit kan besloten Met opmerkingen [CH13]: vertoont
worden dat er geen gevoeligheid voor tandbederf is. De test is ‘s ochtends uitgevoerd, kort
na het poesten van de tanden. Dit tijdsstip kan natuurlijk invloed hebben op de resultaten. Met opmerkingen [CH14]: typo
Een goede mondhygiëne zal tandplak en Lactobacilli verwijderen. Met opmerkingen [CH15]: In de discussie ga je je
resultaten kritisch bespreken en vgl je met de populatie (=
BESLUIT klasgroep).
Komt dat overeen met de literatuur? Verwacht je dit?
Het onderzochte staal is negatief voor de gevoeligheid voor tandbederf. Waarom bvb niemand met ‘matig’ of ‘lichte’ gevoeligheid?
Met opmerkingen [CH16]: Bron?
56% van de onderzochte stalen in de klasgroep vertoonde opvallende gevoeligheid voor Met opmerkingen [CH17]: In een besluit koppel je terug
tandbederf, 44% van de onderzochte stalen zijn negatief voor gevoeligheid van tandbederf. naar je doel.
In je doel zeg je dat je micro-organismen gaat identificeren.
Dan moet ik in je besluit ook kunnen lezen welke dat dan
zijn…
, 2. Onderzoek flora keel en huid
DOEL
Onderzoek naar de flora van de keel en huid door deze uit te platen op verschillende
soorten agars en een gramkleuring uit te voeren. Met opmerkingen [CH18]: Welke? Waarom verschillende?
PRINCIPE Met opmerkingen [CH19]: Ok, maar graag in tekstvorm in
een verslag ipv tabel.
Bodems: Ook weinig meerwaarde van tabelvorm als er zoveel tekst in
staat.
Soort bodem Groei van Principe + bestandsdelen
Bloedagar Aangereikt Staphyloccoci en Er is extra schapenbloed aanwezig.
Differentieel Streptococci Er wordt gekeken naar de hemolytische
activiteit van bacteriën. Er kan namelijk
Staphyloccoci: hemolyse plaatsvinden door cytotoxische
grotere pinhead toxines die worden uitgescheiden door de
kolonies. Ketting bacteriën.
van dezelfde Er zijn 3 mogelijke hemolyse:
lengten. - α-hemolyse, herkenbaar aan de
groenige kleur rond de kolonies. De
Streptococci: groene kleur wordt veroorzaakt
pinpoint kolonies. doordat bacteriën H2O2 produceren
Ketting van waardoor hemoglobine geoxideerd
verschillende wordt tot groen methemoglobine.
lengten - β-hemolyse, herkenbaar aan de
heldere zones rond de kolonies.
Hierbij is er een volledige cellysis van
de RBC waardoor de rode kleur rond Met opmerkingen [CH20]: Eerste keer afkortingen voluit
de kolonie verdwijnt. De bacteriën graag
produceren hemolysine O en S.
- γ-hemolyse, herkenbaar aan de witte
kolonies op een rode agar. Er gebeurt
geen hemolyse waardoor er ook geen
verkleuring zichtbaar zijn.
Chocolate Aangereikt Neisseria spp. De agar lijkt sterk op de bloedagar aangezien
agar er ook hier extra bloed wordt toegevoegd.
Maar tijdens de bereiding zullen RBC hier
lyseren. Deze lysis zorgt voor de
chocoladebruine kleur van de agar. Hierbij
komen er intracellulaire voedingsstoffen vrij
die gebruikt kunnen worden door de m.o. .
Wanneer er p-aminodimethyl oxalaat wordt Met opmerkingen [CH21]: Heb je dit in het labo gedaan?
toegevoegd, zal er een paars/zwarte kleur te
zien zijn op het oppervlak van de kolonies van
Neisseria spp.
Tinsdale Differentieel C. diphtheria Telluriet aanwezig in de bodem zal door de Met opmerkingen [CH22]: Eerste keer genus ook voluit
agar tellurietreductase-activiteit van de bacteriën
gereduceerd worden naar Tellerium. Dit is
een neerslag van metaal en zal zorgen voor
zwarte kolonies. Bruine halo’s rond de
kolonies tonen cystinase-activiteit van m.o.
, aan. Zwarte kolonies met een duidelijke
bruine halo komen enkel voor bij C.
diphtheriae en C. ulcerans
Sabouraud Selectief Schimmels en De pH van de bodem is 5,6 en zorgt ervoor
agar Differentieel gisten dat de groei van schimmels en gisten
bevorderd wordt en de groei van andere
bacteriën geremd wordt. Omdat de bodem
geïncubeerd wordt op 25°C zal de groei van
andere bacteriën alsook geremd worden.
Groei van schimmels is te herkennen aan
fuzzy, poederachtige kolonies. Gisten zijn te
herkennen aan verhoogde, vochtige en
glinsterende kolonies.
MSA Selectief Selectief voor De hoge zoutconcentratie die aanwezig is
Differentieel meeste (7,5%) zorgt ervoor dat de bodem selectief is
grampositieve voor de meeste gram-positieve bacteriën.
(Staphyloccocen)
Het mannitol zorgt dat het medium
Differentieel voor differentieel is voor S. aureus die mannitol
S. aureus die kunnen fermenteren. Wanneer mannitol
mannitol fermen- gefermenteerd wordt, zal er zuur
teren geproduceerd worden. De aanwezige pH
indicator zal bij een lagere pH een gele
verkleuring geven.
Gramkleuring:
De gramkleuring wordt uitgevoerd om de te onderzoeken bacteriën zichtbaar te maken
onder de microscoop. Zo kan er gekeken worden naar de grootte, vorm, organisatie en
morfologie van de micro-organismen. Met deze kleuring wordt er ook een handig
onderscheid gemaakt tussen grampositieve en gram negatieve bacteriën. Grampositieve
bacteriën hebben een dikke peptidoglycaanlaag, die bestaat uit N-acetylglucosamine en N-
acetylmuramine. De gramnegatieve bacteriën hebben een dunne peptidoglycaanlaag die
omgeven wordt door een buitenlipidelaag.
In de eerste stap worden alle cellen paars gekleurd met kristal violet. Daarna wordt er
gekleurd met iodine. Dit zal binden met kristal violet en het complex CV-I vormen waardoor
de kleur extra versterkt wordt. De cellen zullen na deze stap zwart/paars gekleurd zijn.
Vervolgens worden de preparaten in alcohol gebracht. Hierdoor zullen de vetten in de wand
van de gramnegatieven oplossen. Het CV-I complex zal daardoor makkelijker verwijderd
worden uit de cellen waardoor er ontkleuring optreedt. De grampositieven blijven
gedurende deze stap paars gekleurd aangezien hun dikkere celwand stabiel blijft en alcohol
voor dehydratatie zorgt waardoor poriën zullen versmallen. Door een laatste kleuring met
safranine absorberen de kleurloze gramnegatieve bacteriën een roze kleur, de gekleurde
grampositieven zullen geen andere kleur kunnen absorberen. Op deze manier zijn na de
gramkleuring gramnegatieven roze gekleurd en grampositieven paars.
MATERIAAL Met opmerkingen [CH23]: En steriele proefbuizen? Steriel
fysiologisch water? Swabs? Entoog?
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur lauradries1. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €10,49. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.