Resume
Samenvatting instrumentele chemie (deel 3 chromatografie)
- Cours
- Instrumentele Chemie
- Établissement
- Hogeschool Gent (HoGent)
samenvatting slides + schema's
[Montrer plus]
Aperçu du contenu
ChromatografieAlgemene inleiding
= Scheiding van mengsels in de verschillende componenten eventueel gevolgd
door kwalitatieve (identificatie) en/of kwantitatieve analyse.
2 fasen:
- Stationaire fase (SF): Vaste stof of vloeistof die vastzit in de kolom, plaat
of papier.
- Mobiele fase (MF): Gas of vloeistof die zich over de stationaire fase beweegt.
Componenten in mengsel: Verschillende affiniteit voor beide fasen
MF
Eluent
+ staal
SF Elutie A Best oplosbaar in/grootste affiniteit voor stationaire fase
→ Langst in kolom
B Best oplosbaar in/grootste affiniteit voor mobiele fase
→ Migreert snelst
Eluaat
Affiniteit voor een fase → Uitgedrukt als verdelingsevenwicht of
partitiecoëfficiënt
Voorwaarde voor scheiding: Componenten hebben een verschillend
verdelingsevenwicht
[𝐴]𝑠𝑓 [𝐵]𝑠𝑓
𝐾𝑎 = ≠ 𝐾𝑏 =
[𝐴]𝑚𝑓 [𝐵]𝑚𝑓
- Dynamisch
- Organische componenten: verschillende snelheid
Eigenschappen moleculen
Snelheid mobiele fase
Selectieve vertraging → Scheiding
Indeling naar aard mobiele fase:
- Vloeistofchromatografie (LC):
o Mobiele fase → Vloeistof
o Stationaire fase → Vloeistof (LLC)
→ Vaste stof (LSC: HPLC)
- Gaschromatografie (GC):
o Mobiele fase → Gas
o Stationaire fase → Vloeistof (GLC)
→ Vast (GSC)
+ Sneller
+ Scheiden van complexe mengsels
− Vluchtige stoffen: Staal moet om te zetten zijn naar gasfase
, Staalvoorbereiding
EXTRACTIE
- Isoleren doelwitcomponenten
- Concentreren
- Verwijderen interfererende componenten :
o Eiwitten → Enzymen, denaturatie
o Vetten → Lipasen
o Conjugaten → Verhitten bij lage pH, enzymen
Vloeistof – vloeistof extractie
Polariteit:
- Likes likes like
- Extractiebuisje of – trechter
Vaste fase extractie
= Voorbereiding: Opzuiveren bepaalde analieten uit een mengsel om deze erna
met een andere methode te analyseren
Analoog aan principes chromatografie:
o Selectieve verdeling over SF en MF
o Normal – en reversed phase
o Ionenuitwisselingschromatografie
Stappen:
1. Selectie kolom: Specifiek om bepaalde componenten af te zonderen
2. Conditionering kolom: MF laten doorlopen en kolom vochtig maken
3. Lading staal: Deels blijven hangen en deels doorlopen
4. Wasstap: Alles wat niet gebonden is verwijderen
5. Elutiestap: Alles wat wel gebonden is losmaken
6. Droogdampen: Concentratie verhogen
7. Eventueel derivatisatie: Chemische modificatie om stoffen bruikbaar te maken
voor verdere analyse
Toepassingen:
- Klinische chemie
- Minikolommen voor zuiveren DNA, RNA, GM
Standaardisatie
Voor kwantitatieve bepalingen: Standaard met gekende concentratie
Interne standaard → Meest accuraat
- Verschillend van analiet → Homoloog (fluctuatie opvangen)
Identieke fysische/chemische eigenschappen als analyt: detecteerbaar
- Toegevoegd aan staal = spiken
- Signaal interne standaard vergelijken met signaal staal
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur iamMLTer. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €2,99. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.
Peut-on faire confiance à Stuvia ?
4.6 étoiles sur Google & Trustpilot (+1000 avis)
80467 résumés ont été vendus ces 30 derniers jours
Fondée en 2010, la référence pour acheter des résumés depuis déjà 14 ans