In 1A2 wordt er een VO 'enzymkinetiek' gegeven. In dit VO krijg je verschillende opdrachten die je samen met 2 andere studiegenoten maakt. De uitkomsten van deze opdrachten ga je in een essay verwerken. Dit essay moet voldoen aan de eisen van wetenschappelijk schrijven.
Fosfaat: een competitieve
remmer bij de alkalische fosfatase
activiteit
Voornaam Achternaam (studentennummer)
Samenvatting
De vraagstelling van dit onderzoek is of fosfaat als een competitieve of een non-competitieve
remmer werkt bij het remmen van de alkalische fosfatase activiteit. De probleemstelling bij deze
vraag is dat als fosfaat een non-competitieve remmer is, de enzymbepaling storend bevonden
wordt waardoor de alkalische fosfatase waarde onbetrouwbaar is.
Om dit te kunnen beslissen, wordt productievorming met en zonder de remmer bekeken bij
dezelfde hoeveelheid substraat. In een Lineweaver-Burk plot kan men de verschillen in de
Michaelis-Menten constanten (Km) en de maximale snelheden (Vmax) van de alkalische fosfatase
activiteit zien.
De gevonden meetwaarden van de productievorming met de remmer hebben een Km van 0,2
mmol/L en een Vmax van 140 nmol/min. De gevonden meetwaarden van de productievorming
zonder de remmer hebben een Km van 0,1 mM en een Vmax van 200 nmol/min.
Uit de resultaten wordt de conclusie getrokken dat de alkalische fosfatase activiteit wordt
geremd door een competitieve remmer. Hierdoor zal fosfaat de enzymbepaling niet storen, de
alkalische fosfatase waarde betrouwbaar houden en voor spectrofotometrische bepaling ervan
kunnen worden gebruikt.
Inleiding
Alkalische fosfatase (EC 3.1.3.1) is een enzym dat organische fosfaatesters hydrolyseert. Het in
humaan plasma aanwezige enzym is vooral afkomstig van lever- en galepitheel, en van
osteoblasten (1). De alkalische fosfatase activiteit in plasma is sterk verhoogd in patiënten met
cholestase door galwegobstructie, bij sommige leveraandoeningen en bepaalde
botstofwisselingsziekten. Meting van alkalische fosfatase activiteit in plasma heeft dan ook een
belangrijk rol in de diagnostiek van deze aandoeningen (1).
De spectrofotometrische bepaling van de alkalische fosfatase activiteit is gebaseerd op de
omzetting van het kleurloze p-nitrofenylfosfaat in het geelgekleurde p-nitrofenol. De bepaling
van de hoeveelheid aanwezig enzym vindt plaats onder Vmax condities, hetgeen voor een
Michaelis-Menten enzym betekent bij een substraatconcentratie van minimaal 10 maal de KM
(2). Fosfaat remt de activiteit van alkalische fosfatase, en de hoeveelheid fosfaat in serum
verschilt aanzienlijk van persoon tot persoon, en van patiënt tot patiënt. De vraag is of de
aanwezigheid van fosfaat in het serum de enzymbepaling zodanig stoort dat de alkalische
fosfatase waarde onbetrouwbaar wordt voor de diagnostiek. Dat is met name het geval als
fosfaat een non-competitieve remmer is van alkalische fosfatase. Het doel van dit experiment is
1
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur charlottehopmans2. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €3,99. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.
