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Samenvatting Theorie voor de praktijk Immunologie

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De theorie voor de praktijk immunologie samenvatting gaat over de achtergrondinformatie van de technieken die je in de praktijk gaat uitvoeren en die ook worden getoetst op het tentamen. Hierbij gaat het om de technieken die in de lessen worden gebruikt (ELISA, flowcytometrie, MTT en BD accuri C6)

Aperçu 2 sur 12  pages

  • 19 septembre 2022
  • 12
  • 2021/2022
  • Resume
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Theorie van de praktijk Immunologie les 1 blok 3:


-Belangrijk bij celkweek:
>Cellen onderhouden in steriele omgeving (in vitro)
*Bestemming= ongewenste invloed op je cellen
*Grootste gevaar voor besmetting ben jezelf
-Flow Cabinet:
>Safety laminated glass
>Sash level
>Armrest
>Leveling caster
>HEPA filter
>Blower
>LCD digital display panel
>Threshold structure & UV light leak free guard
-Cellen- cellijnen:
>Cellijnen kunnen onderverdeeld worden in:
*Hechtend
*Suspensie
>
Naam Type/Afkomst Hechtend/suspensie
RAW Muis macrofaag Hechtend
L929 Muis fibroblast Hechtend
D011.10 Muis T-cel Suspensie

-Medium-> vloeistof waar cellen in groeien:
>Bestandsdelen:
*Energiebron (glucose)
*Aminozuren:
~Meestal glutamine
~Verst toevoegen
*Vitamines
*Antibiotica:
~Penicilline/streptomycine
~Vers toevoegen
*pH-indicator (fenol rood)
*Inorganische zouten (o.a. osmose regulatie)
*Serum (Tussen 2,5-10%):
~Vers toevoegen
~FCS (Fetal Calf Serum)
~Bron van groeifactoren, hormonen, mineralen en lipiden.
~Belangrijk voor hechting van cellen
-Passeren/doorzetten van cellen:
>Volle laag cellen = monolayer of 100% confluent
>Vertelt wat over de groeifase van de cellen




Made by: Iris Gülcher

, >Suspensie vs. hechtende cellen
*Schrapen (RAW)
*Trypsine (L9292)
>1::10/ 1:…. Doorzetten
>




-Overige aandachtspunten:
>Vloeistoffen/medium toevoegen bij 37℃
>Spullen desinfecteren met 70% ethanol, eigen handen met sterilium
>Denk na voordat je de flowkast in gaat
>Overzichtelijk ingedeelde werkruimte
>Cellen regelmatig onder de microscoop controleren
-Besmetting:
>Mogelijke bronnen:
*Waterbad
*CO2 incubator (meestal 5%)
*Onderzoeker
>Meest voorkomend:
*Bacteriën
*Schimmels/gist
>Hoe te herkennen:
*Slechte groei
*Troebel medium bij hechtende cellen
*Microscopisch vaststellen
*Bij twijfel, vraag je docent
-Cellen tellen:
>Telkamer vs automatische celteller
>Fuchs Rosenthal / Burker Turk
>Cellen/ml= (N cellen)/((N hokjes*b*l*d) )∗1000∗VF
>Voeg Trypan Blue toe 1:1
*Verdunningsfactor = 2
*Welke cellen tel je / wat doet Trypan Blue?
*Blauwe (dode) en kleurloze (levende) cellen
1
>Dus cellen/ml = N cellen x 10.000
-




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