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cours magistral biologie moléculaire
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ludivinehugot
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CM2 biologie moléculairePour les molécules d’ADN :
Le vecteur de clonage est fonctionnelles a l’intérieur de C vivante. C’est un clonage in vivo. ( a l’inverse dans l’in vitro on
a un clonage par PCR par exemple).
2.1 Stratégie de détection de présence d’un vecteur dans une C vivante
2.1.1 Sélection des C transformée ( agent ayant intégré le vecteur) par un agent de sel de type antibiotique.
=> Agent de sélection = antibiotique (exemple : l’ampicilline, kanamycine, tétracycline)
=> gène de résistance porté par le vecteur (ex gène de résistance a l’ampicilline) ? un gène de résistance est une unité
transcriptionnelle qui code une prot, qui modifie chimiquement et qui le rend inopérant, ce qui inhibe la capacité ici
inhibe le process de l’antibiotique.
Les antibiotiques sont des Molec qui empêche la prolifération bactérienne ou détruisent la bactérie. En général ils visent
le processus de production de protéine (la traduction).
Unité transcriptionnelle =un gène
Pour avoir production de prot il faut transcription d’ADN qui contient un promoteur puis la Seq transcrite et la région
terminatrice
Séquence
promoteur terminatrice
transcrite
Schema d’une portion d’ADN nécésssaire pour avoir une production de protein
Chez les levures ça marche pas car c’est des C eucaryotes et donc les anti fonctionne pas. Mais dans les levures il y a des
mitochondrie comme dans les autres C. les mitochondries ont un génome circulaire. Il est dupliqué lors des
multiplication, c’est le support de l’info génétique pour être traduit en prot. Ce mode de fonctionnement est proche de
celui des bactérie vue qu’il est fait par endosymbiose, ce qui fait que nos mitochondries sont attaquées lors de la prises
d’antibio et c’est pour ça qu’on est fatigué
2.1.2 auxotrophie
Auxotrophie :
Certaines levures savent produire des AA essentiels comme la leucine.
Certaines levures possèdent le plasmide 2µ contenant les gènes de synthèse de la leucine. Si elle a le plasmide on dit
qu’elle est auxotrophe pour la leucine (= elle peut se dvlper dans un milieu nan additionné de leucine). Si la levure n’a
pas cet AA alors elle dépend d’un milieu contenant la leucine.
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