Via de theorielessen en de practica is het de bedoeling om aan de toekomstige labotechnologen op het vlak van de moleculaire genetica zowel een ruime theoretische als praktische bagage mee te geven. Moleculaire detectietechnieken worden dagelijks gebruikt in allerhande onderzoekslabo’s en mogen d...
SAMENVATTING MOLECULAIRE BIOLOGIE
Inhoud
Hoofdstuk 1: Samenstelling van DNA en RNA...........................................................................................................2
1.1 Stikstofhoudende heterocyclische basen........................................................................................................4
1.2 Pentosen..........................................................................................................................................................5
1.3 Fosfaatgroep....................................................................................................................................................6
1.4 Nomenclatuur..................................................................................................................................................8
Hoofdstuk 2: Structuur van DNA...............................................................................................................................9
1. Primaire structuur DNA.....................................................................................................................................9
1.2 DNA is gewonden rond basische eiwitten: Histonen....................................................................................11
Hoofdstuk 3: Chromosoomaantallen bij de mens..................................................................................................11
Hoe maak je een karyogram? (Examen).................................................................................................................12
Doelstelling voor het maken van een karyogram (Examen)...............................................................................13
1.3 Lengte en specificiteit van een gen...............................................................................................................13
1.4 X-chromosoom: In- en uitgepakt..................................................................................................................14
Hoofdstuk 4: Mitose en Meiose..............................................................................................................................14
1. Celcyclus (beschrijfcyclus en teken examen)...................................................................................................14
2. Stappen van de meiose...................................................................................................................................17
3. Verschillen tussen mitose en meiose..............................................................................................................21
Gevolgen meiose.................................................................................................................................................21
Oefeningen (bevraagd op examen).....................................................................................................................22
Hoofdstuk 5: Replicatie van DNA............................................................................................................................24
DNA replicatie gebeurt doormiddel van DNA polymerasen...........................................................................24
Enzymen betrokken bij DNA replicatie bij prokaryoten......................................................................................24
Mechanisme van DNA replicatie.........................................................................................................................26
Bidirectionele replicatie..................................................................................................................................28
Verkorten van chromosomen bij replicatie bij eukaryoten............................................................................28
Herstelmechanismen bij replicatie prokaryoten.............................................................................................28
Indeling en structuur van RNA................................................................................................................................29
Verschillende types RNA.....................................................................................................................................29
Structuur van het RNA.........................................................................................................................................30
Synthese van RNA: Transcriptie..............................................................................................................................31
Transcriptie bij prokaryoten................................................................................................................................31
Drie stappen van Transcriptie.........................................................................................................................31
Verschillen tussen transcriptie prokaryoten en eukaryoten..........................................................................32
, Replicatie VS Transcriptie................................................................................................................................33
Eigenschappen van het mRNA................................................................................................................................33
Polycistronische boodschappers.........................................................................................................................33
Monocistronische boodschappers......................................................................................................................34
mRNA splicing..................................................................................................................................................35
Alternatieve splicing........................................................................................................................................35
Eigenschappen prokaryotisch en eukaryotisch mRNA........................................................................................36
Eigenschappen van rRNA en ribosomen.................................................................................................................36
Ribosomen...........................................................................................................................................................36
Samenstelling ribosomen eukaryoten en prokaryoten..................................................................................36
Eiwitsynthese bij eukaryoten..................................................................................................................................37
Wat als startcodon voor translatie gedeleteerd is?........................................................................................37
Mutaties in het DNA............................................................................................................................................37
Soorten mutaties.............................................................................................................................................37
Moleculaire biologie practicum..............................................................................................................................38
Isolatie van plasmide DNA Brimboim – methode...............................................................................................38
Principe Brimboim – methode........................................................................................................................38
Isolatie van plasmide DNA...................................................................................................................................39
Spectofotometer.............................................................................................................................................39
Fluometrie.......................................................................................................................................................40
Scheiden van DNA volgens grootte in agarosegel...............................................................................................40
Principe agarose gelelektroforese...................................................................................................................40
Migratie van DNA............................................................................................................................................40
Wat zie je als je ongeknipt plasmide DNA laadt.................................................................................................41
Capillaire elektroforese...................................................................................................................................41
Bereiden van DNA via silica gebaseerde kolom methode..................................................................................42
Principe silicamembraantechnologie..............................................................................................................42
Procedure........................................................................................................................................................42
Brimboim versus kolom.......................................................................................................................................43
Alternatieve methode voor het bereiden van zuiver DNA.................................................................................43
Begrippenlijst moleculaire biologie.........................................................................................................................44
Een Gen is opgebouwd uit nucleotiden en maakt deel uit van een chromatidedraad
(of chromosoom)
Nucleïnezuren = dragers van de genetische informatie in een levend organisme.
Structuur van nucleïnezuren bevat informatie voor biosynthese van eiwitten.
1. Vermenigvuldigen van DNA = Replicatie
2. DNA (keten van nucleotiden) => Transcriptie
3. RNA (keten van nucleotiden) => Translatie eiwit (keten van aminozuren)
2 Soorten nucleïnezuren:
A) Desoxyribonucleïnezuren in het DNA (komt van Desoxyribose)
B) Ribonucleïnezuren in het RNA (komt van Ribose)
Zowel DNA en RNA zijn opgebouwd uit 4 verschillende nucleotiden
DNA in ons eigen cellen = Genoom
DNA die we meedragen door de micro-organismen in ons lichaam = Microbioom
(tweede genoom)
Het menselijk genoom bevat 25000 genen
Nucleotide opgebouwd uit drie elementen:
, Base
Suiker
Fosfaat
1.1 STIKSTOFHOUDENDE HETEROCYCLISCHE BASEN
De purines:
Adenine (A)
Guanine (G)
De pyrimidines:
Thymine (T)
Cytosine (C)
Uracil (U)
Purines: Dubbele ringstructuren
Pyrimidines: Enkele ringstructuren
Aanwezigheid stikstof: moleculen krijgen
een basisch karakter
Heterocyclische verbindingen = cyclische
verbindingen die één of meer
heteroatomen
(= atomen anders dan koolstofatoom) in
de ring bevatten.
In DNA komen monomeren:
A, G, C, T
RNA bevat de monomeren:
A, G, C, U
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