Garantie de satisfaction à 100% Disponible immédiatement après paiement En ligne et en PDF Tu n'es attaché à rien
logo-home
Recherché précédemment par vous
Recherché précédemment par vous
logo
Verzameling van alle mogelijke examenvragen van het vak scheiding en zuivering van biomoleculen (BMW: behaald resultaat 18/20) €6,49   Ajouter au panier
Accédez rapidement à
Aperçu
  2.  
  3. Universiteit Antwerpen (UA)
  4.  
  5. Biomedische Wetenschappen
  6.  
  7. Scheiding En Zuivering Van Biomoleculen

Examen

Verzameling van alle mogelijke examenvragen van het vak scheiding en zuivering van biomoleculen (BMW: behaald resultaat 18/20)
 10 vues  0 fois vendu

Verzameling van alle mogelijke examenvragen van het vak scheiding en zuivering van biomoleculen (BMW: behaald resultaat 18/20): Hierin staat alles in wat de prof Xaveer Van Ostade heeft aangeven dat je moet kennen voor het examen. Leer deze oude examenvragen (die vaak terugkomen) en je bent er vlot...

[Montrer plus]

Aperçu 3 sur 20  pages

Infos sur le Document

  • 3 novembre 2021
  • 20
  • 2021/2022
  • Examen
  • Questions et réponses

Sujets

École, étude et sujet

Tous les documents sur ce sujet (32)

Vendeur

avatar-seller
lemmeslodders

Avis reçus

Aperçu du contenu

Scheiding & zuivering

Elektroforese alle formules


Elektroforese = de beweging van een geladen molecule (macro-ion) in een elektrisch veld, de
nettolading van de molecule is q=ze, waarbij e de eenheidslading is en z het aantal
eenheidsladingen.

Elektroforetische mobiliteit U: is de verhouding van de migratiesnelheid op het elektrische
veld




U= elektroforetische mobiliteit
E= elektrisch veld
q= nettolading

Bovenstaande formule moest worden aangepast, omdat deze formule is voor macromolecule
opgelost in een solvent zonder tegenionen.
De volgende formule houdt wel rekening met elektrostatische krachten tussen de ladingen van
de moleculen en ionen die de elektroforetische mobiliteit verlaagt.




U= elektroforetische snelheid
ze= nettolading
n= viscositeit van de oplosssing
R= Stokes radius; afmetingen van het macro-ion
k= het omgekeerde van de straal r waarover macromoleculen elkaar nog kunnen beïnvloeden -
> beïnvloedt mobiliteit


Proteïnen, RNA en DNA hebben lading als gevolg van zure en basische groepen waardoor ze
migreren in een elektrisch veld bij een pH die verschilt van hun iso-elektrisch punt. De
migratie wordt bepaald door de verhouding van de lading tot de massa: sneller naar anode als
meer negatieve ladingen bevat.

Scheiding op basis van grootte: kleinere moleculen geraken gemakkelijker door de mazen van
het netwerk waardoor ze migreren tegenover grotere moleculen.

Bufferoplossing:
 pH in de elektrode reservoirs en in de dragen blijft constant
 de elektroliet concentratie is aanvaardbaard om de stroom te dragren

,  de elektroforese buffer mag niet reageren met de macromoleculen tijdens de
migratie


Types elektroforese
 Dunlaagelektroforese
 Gelelektroforese
o Agarase gelelektroforese
o Polyacrylamide gelelektroforese
o Iso-elektrofocusering
 Detectie van eiwitten en nucleïnezuren na gelelektroforese
 CBB
 Zilverkleuring
 Fluorochromen
 Identificatie van eiwitten en nucleïnezuren na gelelektroforese
 Western blot
 Southern en Northern blot
 Massaspectrometrie
 Capillaire elektroforese

Dunlaagelektroforese

Platen (glas, teflon, plastiek) worden bedekt met een drager (cellulose, silicia). De platen
worden bevochtigd en verbonden met de elektrodebuffers. De elektroforese wordt in een
afgesloten systeem uitgevoerd, omdat de elektrodebuffers een lage ionensterkte hebben en
vluchtige stoffen kan bevatten. Geladen moleculen gaan bewegen wanneer een spanning
wordt aangelegd. Er wordt gebruik gemaakt van geladen kleurstffen oom de elektroforese op
te volgen. De moleculen bewegen zich door de drager waarbij de drager als zeef fungeert.
(=1D)
2D elektroforese in twee richtingen loodrecht op elkaar in verschillende buffers of in één
richting gecombineerd met chromotografie in de andere richting, gescheiden stoffen zichtbaar
maken met kleurreactie




Gelelektroforese
Scheiding van macromoleculen in een gepolymeriseerd gelsysteem.
Voordelen:

,  Hoge capaciteit
 Gecontroleerde porositeit
 Verhindering convectie (door opwarming buffer)
 Minimaliseren diffusie
 Snelle eletroforetische beweging
Scheiding op basis van moleculair zeefeffect

Agarose gelelektroforese
Scheiding van nucleïnezuren

Agarose gel wordt gemaakt door het oplossen van agarosepoeder. De poriëngrootte wordt
bepaald door de concentratie agarose. Bv. als je grote moleculen wilt scheiden heb je grote
poriën nodig dus een lagere concentratie.
Agarose polymeriseert door afkoeling.
Relatie tussen de afgelegde afstand en de molecuulmassa: de snelheid daalt logaritmisch met
stijgende molecuulmassa:




Rf= afgelegde afstand
M= molecuulmassa
A en B= afhankelijk van elektroforesesysteem en zijn experimenteel te bepalen met referentie
moleculen

Polyacrylamide gelelektroforese
Scheiden van eiwitten en soms voor korte nucleïnezuren
Polyacrylamide gel wordt gemaakt door polymerisatie van acrylamide en N-N’-
methylenebisacrylamide in aanwezigheid van radicalen. De poriëngrootte wordt bepaald door
de concentratie acrylamide en de verhouding acrylamide/bisacrylamide.




T = totale concentratie aan acrylamide/bisacrylamide
C= concentratie crosslinker = bisacrylamide
a= gewicht acrylamide
b= gewicht bisacrylamide
V=volume mengesel
T + C veranderen -> verschillende porositeit




Continue buffersysteem: wanneer elektroforese wordt uitgevoerd met éénzelfde buffer in het
staal, gel en elektrode reservoirs. Scheiding bepaalt door zeefeffect. Nadeel: grootte van het

Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:

Qualité garantie par les avis des clients

Qualité garantie par les avis des clients

Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.

L’achat facile et rapide

L’achat facile et rapide

Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.

Focus sur l’essentiel

Focus sur l’essentiel

Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.

Foire aux questions

Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?

Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.

Garantie de remboursement : comment ça marche ?

Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.

Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?

Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur lemmeslodders. Stuvia facilite les paiements au vendeur.

Est-ce que j'aurai un abonnement?

Non, vous n'achetez ce résumé que pour €6,49. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.

Peut-on faire confiance à Stuvia ?

4.6 étoiles sur Google & Trustpilot (+1000 avis)

80796 résumés ont été vendus ces 30 derniers jours

Fondée en 2010, la référence pour acheter des résumés depuis déjà 14 ans

Commencez à vendre!
€6,49
  • (0)
  Ajouter