Samenvatting en uitwerking van het onderdeel Eiwitten en Enzymen van Moleculen. Bevat afbeeldingen uit de powerpoints en bijbehorende figuren bij de methoden. Verder bevat het uitwerkingen van de behandelde onderwerpen.
Eiwit onderzoek
- Sommige methoden zijn voor meerdere onderzoeken geschikt, maar niet allemaal.
Analytische methoden
- Doel: kwalitatief en kwantitatief onderzoek; welk eiwit is aanwezig en hoeveel is
daarvan aanwezig
Gelelektroforese
- Scheiding op lading en vorm/grootte
- v = (E x z) : f
- Snelheid = (sterkte elektrisch veld x lading eiwit) : wrijvingscoëfficiënt
- Dragermateriaal: polyacrylamide; moleculaire zeef. Dichtheid bepaalt welke grootte
eiwitten er doorheen kunnen lopen
- Verschillende typen gelektroforese:
SDS-PAGE
- Sodium dodecylsulfaat poly acryl gelelektroforese
- Het SDS denatureert de eiwitten, maakt het een lineaire vorm. Maakt de eiwitten
uniform negatief.
- Alleen scheiding op grootte
- β-mercatoethanol wordt gebruikt om zwavelbruggen te reduceren.
Iso-electric focussing (IEF)
- Polyacrylamide gel met pH gradiënt.
- Op het iso-elektrisch punt van het eiwit is de netto lading nul: het eiwit wordt net zo
hard naar - getrokken als naar +
-
2D elektroforese
- 1e dimensie IEF, 2e dimensie SDS-PAGE
- Van elk eiwit molmassa en iso-elektrisch punt kunnen bepalen
Preparatieve methoden
- Preparatieve methoden zijn gericht op het zuiveren van actief eiwit uit de cel/weefsel
- Eiwitten kunnen van elkaar gescheiden worden op basis van grootte, oplosbaarheid,
lading, bindingsaffiniteit
, - Doel: Het verkrijgen van een oplossing met een zo hoog mogelijke activiteit, met zo
min mogelijk verschillende eiwitten.
Dialyse: in- en uitzouten
- Principe: semi - permeabele membraan laat alleen kleine moleculen door
-
Gel-filtratie
- Kolom met gelbolletjes waar kleine eiwitten in kunnen binden. Je vangt fracties op.
De grote eiwitten komen als eerst uit de kolom.
-
Ionenwisselaar
- Eiwitten binden aan geladen gelbolletjes. De lading van het eiwit bepaalt de
bindingssterkte.
- Met een zoutgradiënt is de binding te verbreken: elutie
, -
(Ultra)-centrifugatie
- Met zeer hoge G krachten deeltjes scheiden.
- De sedimentatiesnelheid (bezinkingssnelheid) is afhankelijk van massa, vorm,
dichtheid van deeltje en dichtheid van oplossing.
-
- (^ gradiëntcentrifugatie)
Antilichamen
- Antilichamen worden gebruikt voor zuivering en detectie van eiwitten. Ze herkennen
een bepaald epitoop, die op een bepaald antigen zit.
- Een polyclonaal antilichaam zijn meerdere antilichamen die meerdere epitopen
herkennen.
- Een monoclonaal antilichaam is een zuiver antilichaam dat een type epitoop herkent.
- Monoclonale antilichamen hebben minder ‘contaminatie/vervuiling’, maar polyclonaal
herkent zelfde antigen in meerdere isovormen.
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur suzanvankranenburg. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €3,99. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.
