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El estudio de los microorganismos lleva consigo la utilización de una amplia gama de medios de cultivo tanto líquidos como sólidos pero previamente es necesario obtener cultivos puros de aquellos. Cualquier inoculo primario contendrá probablemente varios tipos distintos de microor...
MICROBIOLOGÍA GENERAL
PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO. TIPOS DE SIEMBRA. CULTIVO DE BACTERIAS DE
YOGUR
INTRODUCCION
El estudio de los microorganismos lleva consigo la utilización de una amplia gama de medios de
cultivo tanto líquidos como sólidos pero previamente es necesario obtener cultivos puros de aquellos.
Cualquier inoculo primario contendrá probablemente varios tipos distintos de microorganismos que
darán lugar a un cultivo mixto. Efectuando una cuidadosa inoculación en un medio sólido en placa de
cultivo se obtienen colonias separadas de cada microorganismo presente, cada una de las cuales
procede en la mayoría de los casos de la multiplicación de un solo microorganismo. Una sola célula da
origen a una población
genéticamente homogénea y es denominada clon, colonia o cultivo puro.
Entonces, un medio de cultivo es un sustrato natural o artificial o una solución de ciertos nutrientes
que permiten cultivar los microorganismos de una manera más eficiente para su posterior uso en el
laboratorio.
Clasificación de los medios de cultivo
De acuerdo a la consistencia o estado físico:
Medios líquidos: Son medios de cultivo que carecen de un polisacárido denominado agar-
agar extraído de algas marinas del género Gellidium sp. un medio típico es el caldo nutritivo
o el caldo BHI. Al crecer en un medio líquido un microorganismo utiliza los compuestos del
mismo así como excreta los productos metabólicos bacterianos en él y puesto que en el
medio originalmente no contenía estos productos sirven como una ayuda para la
identificación del microorganismo en cuestión. Así ciertos microorganismos originan un
producto denominado indol formado a partir de triptófano presente en la peptona por lo
que cultivando estos microorganismos en un medio rico en nitrógeno (peptona) y exento
de indol pueden efectuarse pruebas con objeto de comprobar si el microorganismo
cultivado es o no productor de indol.
Medios sólidos: Estos medios son usados frecuentemente para aislar microorganismos, en
los medios líquidos los microorganismos al encontrarse libres pueden desplazarse en tanto
que en los medios sólidos se multiplican localmente en el punto de la inoculación y forman
colonias cuya apariencia frecuentemente es típica de cada especie determinada. Para
conseguir medios sólidos se agrega a un medio líquido agar en una proporción del 1.5% al
2%. Hoy en día se presenta en forma de polvo que incluye el agar, el punto de fusión de
estos medios oscila alrededor de los 98ºC y se solidifica al enfriarse al 42-45ºC. Los fluidos
orgánicos como la sangre o el suero sanguíneo que coagulan a 60ºC deben ser incorporados
antes de que se solidifique el agar (por Ej. A 50ºC). La gelatina también puede emplearse
como agente solidificante, se trata de una proteína obtenida a partir del colágeno de la piel,
cuero, tendones, y huesos y forma un gel de buenas características a concentraciones de
, 12-15% en caldo nutritivo siendo su punto de fusión de 22ºC quedando destruidas sus propiedades
al alcanzar temperaturas por encima de 100ºC. Muchas bacterias producen fermentos proteolíticos
y su capacidad de licuar la gelatina se utiliza para clasificar los microorganismos con facultad de
producir la licuefacción cuando crecen a 37ºC o a temperaturas de laboratorio.
Una variante de los medio sólidos son los medios condensados preparados a partir de materias
coagulables como el suelo o la albúmina de huevo y condensados en forma de pico de flauta a
temperaturas cuidadosamente controladas en la zona de los 75ºC.
Medio semisólidos: son medios que usualmente contienen una pequeña cantidad de agar, esta
cantidad promedio es de 0.5%, estos medios son muy usados para determinar la movilidad de un
microorganismo gracias a su escaso poder retenedor, es decir, que no impiden que el
microorganismo móvil se desplace por el medio.
Según las sustancias primarias los medios de cultivo se pueden clasificar en:
Medios naturales: son aquellos medios empleados tal como se encuentran en la naturaleza
para cultivar microorganismos, como ejemplo de estos medios encontramos la leche, los
extractos vegetales o la sangre diluida.
Medios sintéticos: como su nombre lo indica son medios que han sido creados por el
hombre y por lo tanto se conoce su formulación completamente, son utilizados para el
cultivo de microorganismos coincidiendo de antemano los requerimientos nutricionales
que estos organismos necesitan. Como ejemplo podemos mencionar todos los medios
deshidratados que distribuyen las casa comerciales.
Medios semisintéticos: son medios de cultivo que llevan una mezcla de medio naturales y
medios artificiales, ya que algunos de los componentes pueden ser susceptibles a los
tratamientos empleados durante la elaboración de estos medios o tratamientos
posteriores. Como ejemplo de estos medios podemos encontrar el agar Baird Parker o el
agar sangre.
Medio vivos: son aquellos medios que contienen células u organismos vivos y que son
ampliamente utilizados para demostrar reacciones susceptibles de organismos superiores
en presencia de microorganismos causantes de alteraciones, también tienen importancia
en el estudio y cultivo de los virus. Ejemplos de estos medios pueden ser las células de riñón
de mono, huevos embrionados o células de intestino de cobayos y conejos.
Muchos microorganismos tienen la capacidad de crecer o utilizar material inorgánico en
su metabolismo como el CO2, estos son llamados microorganismos autótrofos, otros
requieren para crecer de la presencia de sustancias orgánicas, es decir no son capaces de
utilizar el CO2. Algunos de estos son heterótrofos se pueden desarrollar sobre medio
sencillos sin demasiados nutrientes, algunos por el contrario requieren de una cantidad
suficiente o aún mucho más para poderse desarrollar. En otros casos se requieren de medio muy
elaborados con una capacidad de diferenciar e identificar al mismo tiempo alguna clase o clases de
organismos, para ellos se han desarrollos medios que gracias a la presencia de sustancias especiales
los hacen únicos ya que el crecimiento de ciertos grupos de microorganismos provocan una
reacción
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