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MOLECULAIRE BIOLOGIETHEMA 3: TRANSLATIE & REVERSE GENETICS
Bij prokaryoten zijn de transcriptie en translatie in één
compartiment. De translatie start al als mRNA nog gemaakt
moet worden. In eukaryoten vinden de transcriptie en
translatie in verschillende compartimenten plaats. De
translatie start als de mRNA van de kern naar het
cytoplasma komt. De translatie heeft als doel het maken
van het eiwit uit aminozuren. Het ribosoom koppelt de los gemaakte eiwitten aan
elkaar die gemaakt zijn door tRNA.
TRANSLATIE INITIATIE IN PROKARYOOT
De initiatie wordt gedaan door de kleine ribosomale subunit.
Deze gaat opzoek naar het startcodon, waarbij een ribosomal
binding site zit. De kleine subunit bindt daar aan. Vervolgens
bindt ook een initiator tRNA aan de kleine subunit. Initiator tRNA
heeft wel methionine met een formyl groep aan (aan stikstof
kant) zodat de translatie naar rechts gaat lopen. Hierna
bindt ook de grote subunit en is het ribosoom klaar voor
de elongatie.
TRANSLATIE INITIATIE IN EUKARYOOT
Eerst wordt er initiator complex gevormd (kleine subunit + initiator tRNA +
methionine). Dit is aan de 5’ Cap i.p.v. rond het startcodon. Vervolgens
beweegt het initiator complex van 5’ 3’ opzoek naar een startcodon.
Rondom het startcodon zit een herkenningssequentie (Kozak) en dit wordt
herkend. Hierna bindt de grote ribosomale subunit.
ELONGATIE IN PRO- EN EUKARYOOT
Voor de elongatie vindt er een koppeling plaats van een tweede aminoacyl tRNA
op de A site. In de P site laat de peptideketen los van het tRNA en wordt
gekoppeld aan een aminozuur aan het tRNA in de A site met behulp van peptidyl
transferase (is een ribozym; onderdeel van grote ribosomale subunit). Vervolgens
schuift de boel op. Eerst schuift de grote subunit op (dus naar E site) en daarna
de kleine. Dit proces herhaalt zich steeds.
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