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Samenvatting IA2 deel 1

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Het gaat over scheidingsmethoden zoals chromatografie (HPLC, GC...) daarnaast gaat het ook over kwantificatiemethoden (externe, interne standaard en standaardadditie). ten slotte gaat het nog over elektroforese

Aperçu 2 sur 10  pages

  • 30 décembre 2021
  • 10
  • 2021/2022
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  • Inconnu
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melissamaris1
Instrumentele analyse: Facet scheidingsmethoden

HPLC principe en instrument:

HPLC = high performance liquid chromatografie
DLC = dunnelaagchromatografie

LC = vloeistofchromatografie
GC = gaschromatografie

 LC kan op een breder terrein w toegepast
 Niet beperkt door vluchtigheid of thermische
stabiliteit vd te analyseren componenten

Methanol = ideaal voor GC, heeft laag kookpunt
 Ontbreekt een UV of fluorescentie activiteit

Riboflavine = geen kookpunt,
kan niet verdampen
 UV actieve molecule




Onderaan bevindt zich een pomp die gaat vloeistof pompen,
auto sampler, detector (UV) fluorescentiedetector en flessen
die bovenaan staan zijn de mobiele fasen




Schema
HPLC:

 Pomp, mobiele fase over de kolom
pompen
 Kolom, chromatografische kolom
 Injector, injecteren en mengen met
mobiele fase
 Detecteren door detector, signaal
moet opgevangen worden

, Scheidingsprincipe:

Componenten in mengsel gescheiden obv hun verschil in affiniteit voor de stationaire en
mobiele fase
 Kolom = stationaire fase
 Eluens = mobiele fase

Op polariteit scheiden
- Polair houdt van polair
- Apolair houdt van apolair

Verdelingschromatografie:

Moleculen lossen op in de stationaire fase, evenwicht
tussen conc van de moleculen in de stationaire fase en
die in de mobiele fase

Component gaat zich verdelen over de stationaire en mobiele fase
 Als ze bij de mobiele fase graag zitten dan komen ze er snel uit
Grootste deel bevindt zich in de stationaire fase (blauw)

Cs = stationaire fase
Cm = mobiele fase
K = evenwichtsconstante

K = (Cs/Cm)

Mobiele fase:

Moet goed gekozen worden  voor chromatogram met
voldoende resolutie
Polariteit van het eluens heeft dus een grote invloed op de
scheiding

 Potentiële mobiele fases (organische oplossingen)
 Water is het meest polair
 Cyclohexaan minst polair
 Altijd samen met water (het is relatief goedkoop)


Isocratische elutie (= constante elutiesterkte)
Voorbeeld  80/20 MeOH/H2O
- De laatste component heeft veel tijdverschil voor deze eruit komt

Gradiënt elutie
- Samenstelling van mobiele fase wijzigen in functie vd tijd wordt minder polair, elutiesterkte
gaat veranderen) gaat van 75 min naar 30 min

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